قياس الضوء الطيفي
السبكتروفوتومتر هوجهاز لقياس كمية الضوء للمادة المستعملة عن طريق طول الموجة التي توجه للجهاز.
ان جميع مادة تمتص الاشعة بطول موجة خاص بها (اذا طول الموجة في مجال الضوء المرئيقد يكون لها لون نستطيع ان نراه) ..البيرمنغنات يمتص طول موجة خاص به (وفي تجربتنا وجهنا للجهاز طول موجة يساوي 520nm وذلك لان اللون الاخضر هواللون المضاد للون البيرمنغنات والذي لونه بنفسجي.
كيف يعمل الجهاز؟
في جهاز السبيكتروفوتومتر هنالك مصدر ضوء يعطي اشعة ونستطيع تحديد طول موجة الاشعة التي يعطيها ، وفي هذا الجهاز مكان خاص نستطيع وضع المادة التي نريد فحصها فيه ، والهدف من الضوء هوفحص "هل المحلول يمتص الضوء ام لا؟" اذا امتصته فانه يخرج لنا كمية امتصاص الضوء .A بحدثات اخرى لفحص A البيرمتغنات نوجه له ضوء بطول موجة ملائم للمذاب الموجود في المحلول وفي هذه الحالة طول المو0جة الملائم هو520 nm وكما ذكرت فهذه طول موجة المضاد للون محلول البيرمنغنات ، اضف إلى ذلك ان الضوء يمر من خلال المحلول بشدة ضوء معينة (I0 ) ، اما عن تحديد شدة الضوء التي يمررها المحلول فالجهاز يقوم بذلك (I0 - I)
لماذا نحتاج إلى جهاز السبكتروفوتوميتير ؟
نقوم في هذه التجربة بفحص البيرمنغينات بتراكيز مختلفة لكي نجد هجريز المحلول المجهول..ان فهم "امتصاص الضوء" تساعدنا في التعامل مع قانون "بير-لامبير"
قانون بير-لامبير
قام الباحثان بير ولامبير قاما بدراسات حول العلاقة بين هجريز المذاب في محلول وبين كمية الضوء التي يقوم بامتصاصها المحلول وقد وجدا ان العلاقة بين كمية الاشعة التي يمتصها الضوء (I0 - I) وبين هجريز المحلول هي علاقة لوغاريثمية ، لذا قاما بتعريف مصطلح حديث الا وهوال Absorbance .
Aλ = − log(I / I0 )
A = log10 I0 / I
A = log10 1 / T
A = log10 100 / %T
A = 2 - log10 %T
قانون بيرلمبير ينطبق فقط بطول موجة الذيقد يكون مناسب للمادة التي يمتصها المحلول المستخدم بالتجربة, اذ ان جميع مادة في الطبيعة تمتص ضوء بطول موجة خاص بها فالبرينغات مثلا يمتص ضوء بموجة 520nm كما ذكرت اعلاه... (بحدثات القول انه لكي نفحص الامتصاص نعطي ضوء بطول موجة ملائم) قانون بيرلامبير ينطبق اذا كان A≤1 ، فلكي تكون العلاقة طردية بين A وC يجب ان تكون تراكبز المذاب منخفضة (فقط اذا قمنا بفحص العلاقة بين الهجريز والامتصاص) فاذا كان A>1 نكون مجبرين على عمل تخفيف لانه اذا لم نقم بذلك فقانون بيرلمبير غير سليم.
حتى نستطيع استخدام اي جهاز لفحص الامتصاص (A) يجب انقد يكون صافٍ اي ان لا تكون فيه مواد اوجسيمات غير مذابة والسبب في ذلك ان الجسيمات الغير ذائبة لا تجعل الضوء يمر بشكل لازم فهي تمنع الضوء من الاستمرار بمروره بخطوط مستقيمة من خلال المحلول حيث انها تشتته.. اضف إلى ذلك ان هذا الامر اي عدم مرور الضوء "بكمية" لازمة اي بكمية اقل من المفروض ان تكونقد يكون مقدار ال A عالي ومن المفهوم ضمنا ان السبب في ذلك هوالعكر.
انظر أيضاً
- Ultraviolet-Visible spectroscopy
- Infrared spectroscopy
- Colorimeter
- Atomic Absorption Spectrophotometry
- Quantification of nucleic acids
Agar plate • Aspirator • Autoclave • Bunsen burner • Calorimeter • Colony counter • Colorimeter • Centrifuge • Fume hood • Incubator • Homogenizer • Laminar flow cabinet • Magnetic stirrer • مجهر • Microtiter plate • Plate reader • Spectrophotometer • Stir bar • ترمومتر • Vortex mixer • Static mixer
المعدات الزجاجية بالمعمل
Beaker •
Boiling tube •
Büchner funnel •
Burette •
Condenser •
Conical measure •
Crucible •
Cuvette •
Laboratory flasks (Erlenmeyer flask, Round-bottom flask, Florence flask, Volumetric flask, Büchner flask, Retort) •
Gas syringe •
Graduated cylinder •
Pipette •
Petri dish •
Separating funnel •
Soxhlet extractor •
أنبوب اختبار •
Thistle tube •
Watch glass
